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【植物血球凝集素PHA-P】用途_簡介說明_試劑準備_注意事項
點擊次數:1725 更新時間:2018-04-10

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【植物血球凝集素PHA-P】用途_簡介說明_試劑準備_注意事項

【植物血球凝集素PHA-P】詳細說明

【簡介說明】

植物血球凝集素(Phytohaemagglutinin,PHA) 也稱植物血凝素,為低聚糖(由D一甘露糖、氨基葡萄糖酸衍生物所構成)與蛋白質的復合物,屬于高分子糖蛋白類,存在于一些豆類種子中,對紅細胞有一定凝集作用故名。

 

【試劑準備】

1、TE: 10mM Tris-HCl (pH 7.8); 1mM EDTA (pH 8.0)。

2、TBS: 25mM Tris-HCl (pH 7.4); 200mM NaCl; 5mM KCl。

3、裂解緩沖液:250mM SDS; 使用前加入蛋白酶K至100mg/ml。

4、20% SDS

5、2mg/ml蛋白酶K

6、Tris飽和酚(pH 8.0)、酚/lv仿(酚∶lv仿=1∶1)、lv仿

7、無水乙醇、75%乙醇

 

【用途】

PHA是一種促細胞分裂原(mitogen)。在體外能刺激小淋細胞轉化成具有免疫活性的淋細胞,并促進其分裂。轉化的淋巴細胞能分泌各種淋巴因子。

1、PHA對外周周血淋巴細胞的轉化作用。外周血淋巴細胞與PHA在體外一起培養,可使小淋巴細胞轉化為淋巴母細胞。

2、PHA刺激淋巴細胞有絲分裂。

3、PHA能增強淋巴細胞玫瑰花環率,可用以判斷機體細胞免疫功能。

4、PHA有促進腹腔巨噬細胞的吞噬作用。

5、PHA能誘導產生細胞移動抑制因子。

6、PHA能用于淋巴細胞亞太群研究。

 

【注意事項】

1、所有用品均需要高溫高壓,以滅活殘余的DNA酶。

2、所有試劑均用高壓滅菌雙蒸水配制。

3、用大口滴管或吸頭操作,以盡量減少打斷DNA的可能性。

4、用上述方法提取的DNA純度可以滿足一般實驗(如Southern 雜交、PCR等)目的。如要求更高,可參考有關資料進行DNA純化。

 

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