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改良番紅O-固綠軟骨染色液染色原理
點擊次數(shù):1509 更新時間:2018-06-11

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  【信息說明

  產品名稱:改良番紅O-固綠軟骨染色液

  供應商:遠慕生化試劑廠家

  規(guī)格:5×50ml/5×100ml

  分類:骨組織染色

  儲存條件:室溫,避光,6個月

  用途:軟骨染色

  注意事項:主要由固綠染色液和番紅O染色液組成。染色時,注意分化時間,否則容易導致過染或脫色

 

  【操作步驟

  1、標本的處理:10%福爾馬林固定、脫鈣、石蠟切片。

  2、常規(guī)脫蠟至水。

  3、入新鮮配制的Weigert染液染色3-5min。

  4、酸性乙醇分化液分化15s。

  5、蒸餾水洗1min。

  6、在固綠染色液內浸染5min,蒸餾水洗1min。

  7、入SafraninOstain內浸染1-2min,蒸餾水洗1min。

  8、用乙酸溶液洗滌切片1-2min,以便去除殘留的固綠,蒸餾水洗1min。

  9、分別用95%乙醇、無水乙醇脫水。

  10、二甲苯透明,光學樹脂封固。

 

  【注意事項

  1、需要顯示細胞核時,盡量采用鐵蘇木素染色,其著色力強色調濃,一般的蘇木素著色力不強。

  2、Weigert蘇木素染液不可預先配制后放置,配制好后一般24h失去染色能力。

  3、切片在SafraninOstain中染色不宜過長,否則易導致背景的深紅色不易分化掉。

  4、切片分化時間應恰當,以背景呈綠色為宜。

  5、SafraninOstain染色后,不宜在低濃度乙醇脫水,否則易褪色。

  6、95%乙醇脫水時間不宜過長。

  7、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

  【染色原理

  改良番紅0-固綠軟骨染色法的染色原理在于嗜堿性的軟骨與堿性染料番紅O結合呈現(xiàn)紅色,嗜酸性的骨和酸性染料固綠結合而成綠色或藍色,與呈現(xiàn)紅色的軟骨對比鮮明,從而將軟骨組織和骨組織區(qū)分開。番紅O是一種結合多陰離子的陽離子染料,其顯示軟骨組織是基于陽離子染料與多糖中陰離子基團(硫酸軟骨素或硫酸角質素)結合。

  番紅O著色與陰離子的濃度近似成正比關系,間接反映了基質中蛋白多糖的含量和分布。當軟骨受到損傷時,軟骨中的糖蛋白會釋放出來,使基質成分分布不均勻,從而導致番紅O淡染或不著色。通過圖像分析軟件可對番紅O染色的軟骨基質進行定量分析。固綠與膠原纖維結合,不宜褪色。番紅O-固綠染色的分化很關鍵,分化過度易導致切片不著色,分化不足易導致切片著色過深。

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