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雞N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA檢測試劑盒說明
點擊次數:997 更新時間:2018-06-19

  上海遠慕生物詳細講述雞N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA檢測試劑盒的相關咨訊,本司的EILSA試劑盒有進口及國產品牌供您選擇,種屬眾多,價格實惠,提供免費代測服務,全程提供實驗操作指導,種屬包含大鼠,小鼠,人,雞,兔,植物,駱駝,豚鼠,馬,猴,豬,狗及其他種屬等,歡迎訂購!

 

  【信息說明

  中文名:雞N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒

  中文別名:雞N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA Kit

  供應商:上海遠慕

  規格:96T/48T

  保質期:6個月,所有試劑盒均提供新批次。

  方法:酶聯免疫法/酶免法

  種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。

  特點:敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩定、易保存,操作簡便。

  用途:用于測定血清,血漿及相關液體樣本中相關含量或活性。

 

  【樣本要求

  1、血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。

  2、血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。

  3、尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

  4、細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

  5、組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

  6、標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.

  7、不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

 

  【性能優點

  1、靈敏度高,檢測時間短,只需4小時

  2、成本低,操作簡單

  3、樣本多樣,血漿、尿液、細胞上清液等

  4、檢測適用于多種不同動物物種

  5、標準范圍廣,允許使用高濃度樣本

 

  【操作步驟

  1、使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。

  2、根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。

  3、加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。

  4、甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。

  5、每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。

  6、甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。

  7、每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。

  8、取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。

  9、在450nm波長處測定各孔的OD值。

 

  【注意事項

  1、試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。

  2、實驗中不用的試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。

  3、實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。

  4、不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。

  5、使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。

  6、使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

  7、洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

  8、底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

  9、加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

  10、按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

 

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