一、標準菌株的概念及其應(yīng)用

　　1.1標準菌株概念

　　1）GB/T 27405-2008

　　實驗室質(zhì)量控制規(guī)范食品微生物檢測：

　　①標準培養(yǎng)物：標準菌株、標準儲備菌株和工作菌株的統(tǒng)稱。

　　②標準菌株：至少定義至屬或種水平的菌株。按其特征進行分類和描述，有明確的來源。

　　③標準儲備菌株：標準菌株經(jīng)過一代轉(zhuǎn)接后獲得的同種菌株。

　　④工作菌株：由標準儲備轉(zhuǎn)接后獲得的同種菌株。

　　1.2標準菌株的應(yīng)用：

　　各種國際標準、國家標準、行業(yè)標準及企業(yè)標準等的相關(guān)微生物檢測，用于驗收培養(yǎng)基(包括試劑盒)、驗證方法和評估實驗操作。

　　二、微生物菌種管理的相關(guān)流程

　　2.1菌株的采集：

　　實驗室用菌種一是到國家法定機構(gòu)采購，二是購買ATCC菌種，三是科研中菌種交流。不管是哪種來源，均統(tǒng)一采集。采集中嚴格按照規(guī)范執(zhí)行。要求包裝可靠，采集迅速，不泄漏不污染。保證菌種合格和環(huán)境安全。采集中要有菌種傳代標識。選擇有資質(zhì)的標準菌株的合格供應(yīng)商，每批標準菌株必須附帶有供應(yīng)商的合格證或檢測報告或說明書，來證明所采購的標準菌株是合格的。

　　2.2標準菌株和驗收

　　實驗室收到標準菌株，首先應(yīng)進行符合性感官檢查，記錄菌株號和標準菌株來源途徑信息，確保溯源性清楚。同時還應(yīng)記錄標準菌株名稱和數(shù)量、生產(chǎn)日期、接收日期和有無破損等情況。

　　2.3凍干標準菌株的復(fù)活

　　2..3.1開啟產(chǎn)品包裝：先用70%酒精棉擦拭外包裝，從凹口處撕開產(chǎn)品外包裝，撕掉標簽上的拉片，將其貼于菌株接收、保存記錄序號前面。

　　2.3.2復(fù)活：選擇合適的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件（根據(jù)生產(chǎn)商說明或有關(guān)技術(shù)通則見附錄）進行復(fù)活。菌種的首ci活化最好是在非選擇性瓊脂培養(yǎng)基上，除非特殊情況或特別推薦，一般不用液體培養(yǎng)基。凍干菌株的傳代次數(shù)不得超過5代，從標準菌株保藏中心購買的凍干標準菌株為第F0代。

　　捏管帽處安瓿瓶（僅一次）使其釋放水合液體。垂直握住安瓿瓶并輕拍之，使液體流入含小球的管底。通過擠捏壓碎小球使其與液體混合，立即將拭子浸于水合液體。擠壓并旋轉(zhuǎn)拭子，接種于初級培養(yǎng)平板，接種圈的直徑約為25mm，用一無菌接種環(huán)在先前接種區(qū)域劃線10-20次，促使分離出單菌落。同時吸出部分菌液接種胰蛋白胨大豆肉湯管，副溶血性弧菌接種3%氯化鈉菌胰蛋白胨大豆肉湯管。將接種好的平板和管立即進行培養(yǎng)。細菌培養(yǎng)溫度通常為25℃或37℃。多數(shù)凍干菌株會在幾天后長出，但是少數(shù)菌會表現(xiàn)出延滯期延長的現(xiàn)象，需要將正常培養(yǎng)時間加倍。復(fù)活后的菌株為F1代。