細胞培養是大多數生物實驗室都會遇到的基礎實驗，但不是-簡單的實驗。細胞培養蘊含著大學問。細胞培養狀態不好相信每個細胞培養者都遇到過。有時候細胞狀態不好，轉染 、藥篩這些實驗根本就沒辦法做。影響細胞培養的因素很多，但首要因素是選好合適的細胞培養基。很多研究者只對一兩種培養基比較了解，下面讓我們詳細介紹一下各種培養基的不同之處。

培養基

基礎培養基絕大多數是建立在平衡鹽溶液（BSS）基礎上，添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營養物質。-廣泛應用的基礎培養基是MEM ，其中含有13種必須氨基酸、8種維生素。

目前科研市場經典的培養基有很多種，其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是應用-廣泛的培養基。其他如M199、IMDM、L15培養基等也用于某些細胞的培養。

◆ MEM是由基礎培養基(BME)發展而來的，其中增加了組分的范圍及濃度。

◆ 改良的基礎培養基培養基也就是我們所說的DMEM培養基初是為小鼠成纖維細胞培養專門設計的，現在常用于貼壁細胞的培養。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的4倍，采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L，后來為了某些細胞的生長需要，將葡萄糖含量又調整為4500 mg/L，這就是大家常說的低糖和高糖了。

◆ a-MEM含有附加的氨基酸、維生素以及核苷和脂肪酸，它可廣泛應用于各種細胞類型，包括對營養成分要求苛刻的細胞。

◆ Ham’s F12是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設計的，現在也廣泛應用于克隆形成率的分析及原代培養。F12還可以與DMEM 等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結合的產物，這種培養基已應用于許多原代培養及更難養的細胞系的培養。

◆ RPMI 1640培養基是專為淋巴細胞培養而設計的，現在已廣泛應用于懸浮細胞的培養。

很多新人經常困惑細胞該用哪一種培養基呢?其實這個問題的答案可以很簡單，也可以好復雜。如果這種細胞是購自細胞庫，那您直接問供應商就行了，他們會給您一個-適合的推薦。如您不知道細胞的來源，您也可以找到相關的文獻，基本文獻中使用的培養基都可作為參考。但如果你是著手建立一種全新細胞的培養體系，根本找不到任何參考，那你就得花點時間自己試驗。在MEM中培養的細胞，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長。總之，首-選MEM做貼壁細胞培養、RPMI 1640做懸浮細胞培養會是一個好的開始。-好同時選購幾種不同的培養基同時進行培養實驗來選擇其中-適合的。有時候你會驚訝地發現你的-佳培養條件與文獻報道的不同，就算是同一種培養條件，細胞的生長狀態也時好時壞，這是很正常的。因為試劑、水、不同批號的血清之間都存在著差異。要提高培養基的穩定性，可以從培養基和血清兩方面入手。

以前大部分實驗室都是用干粉培養基，但干粉有很多弊端

1. 配制過程就較為繁瑣，要溶解、調pH值，過濾，過程中可能會產生一些濃度誤差，

2.有些實驗室的水質并不理想，所以培養的效果會有差異。

如果使用液體培養基，這種人為的誤差會減少，因為畢竟是大批量工業化生產的，批間差會很小。

血清

說到細胞培養，血清固然是細胞培養中*的成分，但血清的批間差異大，更換血清時需要做大量的測試以取保替換的血清與原來的相似。而血清的供應也是必須要考慮的因素。由于氣候或瘋牛病等的影響，血清貨源的問題對實驗的影響可非同小可。另外，血清的價格也很昂貴，高品質的澳洲血清價格更高。因此，也有一些實驗室開始換用無血清培養基。

無血清培養基(Serum-Free Media)，

通常以SFM表示，顧名思義，就是在細胞培養中不需要添加血清，但是在某些應用中可能要添加生長因子或細胞因子。無血清培養基中添加了血清的主要成分：粘附因子、生長因子、必需的營養物質和激素等，能減少上述血清帶來的不利因素，使細胞培養的條件更穩定。但它也不是完美的，從有血清培養過渡到無血清培養的條件并不像想象中那么直截了當。處于發育的不同分化階段的細胞(例如干細胞與定向前體細胞相比)需要不同的配方，對生長因子和細胞因子的選擇尤為重要。而且在去除血清的同時，也去除了一些血清蛋白具有的保護、解毒作用，因此對試劑、水的純度和儀器清潔度的要求更高。另外，它的價格也比普通的培養基貴很多。

細胞培養基應用選擇

選擇培養基沒有固定的標準，有幾點建議可供您參考：

（1） 建立某種細胞株所用的培養基應該是培養這種細胞首-選的培養基。可以查閱參考文獻，或在購買細胞株時咨詢。

（2） 其它實驗室慣用的培養基不妨一試，許多培養基可以適合多種細胞。

（3） 根據細胞株的特點、實驗的需要來選擇培養基。如小鼠細胞株多選 RPMI1640。

（4） 用多種培養基培養目的細胞，觀察其生長狀態，可以用生長曲線、集落形成率等指標判斷，根據實驗結果選擇-佳培養基，這是客觀的方法，但比較繁瑣。