菌落總數檢測

1、為什么平板計數瓊脂需要調節pH？

由于大部分細菌是嗜中性的，培養基為符合細菌生長要求，需要調節pH至7.0±0.2，盡量保證較適宜的環境，確保檢測結果的準確性。

2、如何保證檢測結果的有效性？

設計空白對照

（1）檢驗過程中需要做空白對照，用來判斷培養基、稀釋液、平皿或吸管是否存在污染，完/美的空白試驗平板上應該無細菌生長。

實驗環境要求

（2）定期檢測空氣潔凈度，判斷實驗環境是否符合標準要求。

滅菌處理

（3）細菌檢測過程中所用到的一切用具和培養基都需經過滅菌程序。

3、如何提高檢測結果的準確性？

樣品消毒

（1）任何樣品在打開包裝前，都要在取樣開口處的周圍表面進行消毒。

（2）采樣時對于易堵塞吸管的樣品（如糕點面包辣條等），可以放置一塊無菌紗布在放樣液的容器瓶口下方，作過濾用。

稀釋度選擇

（3）不同的食品其「菌落總數」的檢出限/量也不一致，通常糕點類樣品中細菌量偏低，稀釋度應選擇較小的，稀釋度可選1:10 。

4、為什么瓊脂凝固后需要倒置？

平板倒置培養，可以減少培養基中水分的蒸發影響細菌生長，又可以防止凝結在皿蓋上的水蒸氣流到培養基表面導致染菌出現菌落蔓延及難以計數。

5、為什么培養基干裂？

干裂是培養基的水份缺失導致，通常2種原因：

（1）培養箱內部溫度不穩定導致；

（2）培養基倒得太薄。

6、菌落蔓延的原因及解決辦法？

菌落蔓延主要有兩個原因，一是操作不當；二是樣品中含有變形桿菌等運動性強的細菌。

操作中需要注意3個關鍵點：

（1）傾注培養基時搖晃平皿使其混合均勻，減少菌塊；

（2）樣品稀釋后，盡快傾注平板。從稀釋到傾注結束時間控制在30分鐘之內，避免樣液干涸造成菌落成團；平板凝固后馬上倒置；

（3）若樣品中含有變形桿菌，則可以覆蓋一層培養基（約4mL）。

7、異常現象平板如何進行菌落計數？

在完成培養后應立即進行計數，通常選取30-300CFU菌落數、無蔓延菌落生長的平板作為計數，但實際操作中會出現各種異常現象。

我們通過以下表格查看：

另外，當所有稀釋度的平板均無細菌生長，則檢測報告應以最/低稀釋度報出，如最/低稀釋度為1，則報為＜1；若最/低稀釋度為1:10，則報為＜10，而不能報為「未檢出」。