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上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司

產(chǎn)品名稱:人血管活性腸肽(VIP)ELISA檢測試劑盒說明書

產(chǎn)品型號:

產(chǎn)品報價:985

產(chǎn)品特點:人血管活性腸肽(VIP)ELISA檢測試劑盒說明書由上海遠(yuǎn)慕提供,我司詳細(xì)為您接好它的規(guī)格,檢測限,實驗操作步驟等。中文名:人血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒,規(guī)格:96T/48T, 預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測定血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。ELISA試劑盒標(biāo)本的采集與保存:包括血清,血漿,組織細(xì)胞等。

人血管活性腸肽(VIP)ELISA檢測試劑盒說明書的詳細(xì)資料:

    上海遠(yuǎn)慕為您提供人血管活性腸肽(VIP)ELISA檢測試劑盒說明書,我司是專業(yè)經(jīng)營生物培養(yǎng)基,進(jìn)口/國產(chǎn)ELISA試劑盒,抗體,細(xì)胞,標(biāo)準(zhǔn)品,對照品的公司,在廣大用戶的幫助和支持下,經(jīng)過不懈的努力,已成為國內(nèi)生命科 學(xué)領(lǐng)域產(chǎn)品的主要供應(yīng)商之一,代理許多先進(jìn)水平的高科技產(chǎn)品,包括分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、診斷等多個研究及應(yīng)用領(lǐng)域。公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò) 遍及全國,在同行獲得*好評。專業(yè)供應(yīng),是國內(nèi)的供應(yīng)商,咨詢!

    中文名:人血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒

    別名:人血管活性腸肽(VIP)ELISA Kit

    供貨商:上海遠(yuǎn)慕

    產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T

    檢測限:1.0 nmol/L

    標(biāo)記物:HRP

    檢測方法:雙抗體夾心法測抗原、雙抗原夾心法測抗體、間接法測抗體、競爭法測抗體、競爭法測抗原、捕獲包被法測抗體、ABS-ELISA法。

    預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測定血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。

人血管活性腸肽(VIP)ELISA檢測試劑盒說明書

    ELISA試劑盒包含以下各組分:

    (1)結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;

    (2)洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;

    (3)酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);

    (4)酶的底物;

    (5)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),ELISA試劑盒參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測定中);

    (6)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);

 

    標(biāo)本的采集與保存:

    1.血清:全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

    2.血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

    3.組織勻漿:用預(yù)冷的 PBS (0.01mol/L, pH=7.2-7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織不對應(yīng)體積的 PBS(一般按 1:9 的重量體積比,比如 1g 的組織樣品對應(yīng) 9mL 的 PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記彔。推薦在 PBS 中加入蛋白酶抑制劑)加入玱璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。zui后將勻漿液于 5000×g 離心 5~10 分鐘,取上清檢測。

    4.細(xì)胞培養(yǎng)上清或其他生物標(biāo)本:

    請 1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

 

    自備物品

    1、 酶標(biāo)儀(建議儀器使用前提前預(yù)熱)

    2、 微量加液器及吸頭,EP管

    3、 蒸餾水或去離子水,濾紙

 

    操作步驟:

    實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫,試劑不能直接在37℃溶解;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

    1、加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50?l,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40?l,然后再加待測樣品10?l(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

    2、溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。

    3、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

    4、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

    5、加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50?l,空白孔除外。

    6、顯色:每孔先加入顯色劑A50?l,再加入顯色劑B50?l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘。

    7、終止:每孔加終止液50ml,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

    8、測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

 

    結(jié)果判斷與分析

    1、 儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值

    2、 以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的LTB4標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的LTB4含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度,再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。

 

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