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    產品名：人5脂加氧酶（5-LO/LOX）ELISA試劑盒

    別名：人5脂加氧酶（5-LO/LOX）ELISA Kit

    供貨商：上海遠慕

    試劑盒成分：酶標板，試劑，標準品等。

    產品規(guī)格：96T/48T

    保存溫度：2到8度低溫保存

    經營種類：進口分裝和原裝、國產。

    檢測范圍：人、綿羊、小鼠、大鼠、豬、兔、山羊

    預期應用：ELISA法定量測定血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清或其它相關生物液體中的含量。

    ELISA試劑盒組成及試劑配制

    1. 酶聯(lián)板：一塊（96孔）

    2. 標準品（凍干品）：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為1,600

    人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA檢測試劑盒技術原理：

    （1）抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。

    （2）結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。

    （3）酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。

    （4）受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。

    （5）此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。

    （6）加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重復性好。

    人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA檢測試劑盒特點：

    1.專一性強。抗原與抗體的免疫反應是專一反應，而免疫酶技術以免疫反應為基礎，所檢測的對象是抗原（或抗體），使用的抗體除標記了酶以外，與普通抗體的免疫反應特性并無多大差別。

    2.靈敏度高。由于抗體聯(lián)結上了酶，因此，借助于酶與底物的顯色反應，顯示抗原與抗體的結合，大大提高了檢測的靈敏性，使檢測水平接近放射免疫測定法。

    3.樣品易保存。經過酶反應顯示的有色產物大多比較穩(wěn)定，因此有利于樣品的保存。

    4.結果易觀察。對檢測結果即可用肉眼觀察，又可用顯微鏡觀察，也可以用分光光度計進行比色測定，還可用顯微鏡觀察。這是因為某些酶反應產物能使電子密度發(fā)生改變，從而引起被檢測物的顯示。

    5.可以定量測定。溶液中的抗原物質，應用酶免吸附技術進行比色測定，依據(jù)光密度值的變化，可以定量。預計用細胞分光光度計可對組織內的抗原進行免疫酶技術的定量測定。

    6.可以大規(guī)模測定樣品。如有成千上萬份樣品需要進行檢測，免疫酶技術都能在較短時間內完成。

    7.儀器和試劑簡單。對免疫沒技術來說，不需要熒光顯微鏡，也不需要測定放射性的特殊儀器，所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑，普通實驗室及生產應用單位均易購置。

    人ELISA試劑盒操作步驟：

    1.標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在*、第二孔中分別加標準品100μl，然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為1800ng/L，1200ng/L，600ng/L，300ng/L， 150ng/L）。

    2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

    3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

    4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

    5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

    6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

    7. 溫育：操作同3。

    8. 洗滌：操作同5。

    9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。

    10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

    11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

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