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    中文名：人糖蛋白130（gp130）ELISA試劑盒

    別名：人糖蛋白130（gp130）ELISA Kit

    供貨商：上海遠慕

    貨號：YM-S0036

    規格：96T/48T

    保存：2-8℃

    檢測限：科研

    庫存：現貨

    主要成分：酶標板，試劑，標準品等。

    樣本：血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等。

    Elisa試劑盒特點：靈敏性高、特異性強、重復性好。

    標本要求

    1.標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。

    2.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

    ELISA試劑盒實驗前準備

    1.使用前應將盒內各試劑取出，室溫放置至少30分鐘。

    2.準備各種實驗儀器及材料，如微量移液器，吸頭，醫用蒸餾水等

    3.濃縮洗液與醫用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應用洗滌液

    4.濃縮樣品稀釋液與醫用蒸餾水1︰4倍稀釋成應用樣品稀釋液

    5.用應用樣品稀釋液來稀釋樣品，按照1：100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應用樣品稀釋液中，充分混勻待用。

    操作方法：

    1.從已平衡至室溫的密封袋中取出試驗所需板條，未用的板條和干燥劑請放回鋁箔袋內封存于2-8℃。

    2.預留空白孔（若使用雙波長讀板，空白孔可以不設）。

    3.分別將標本或不同濃度人IL-2標準品（0pg/ml孔加標準品稀釋液）加入相應孔中（100μl/孔），用封板膠紙封住反應孔，37℃孵箱孵育90分鐘。

    4.提前30分鐘制備生物素化人IL-2抗體工作液。

    5.洗板3次。

    6.加入生物素化人IL-2抗體工作液（100μl/孔）。用封板膠紙封住反應孔，37℃孵箱孵育60分鐘。

    7.提前30分鐘制備酶結合物工作液。室溫避光放置。

    8.洗板3次。

    9.除空白孔外，加入酶結合物工作液（100μl/孔）。用封板膠紙封住反應孔，37℃孵箱，避光孵育30分鐘。

    10.洗板5次。

    11.加入TMB顯色工作液（包括空白孔）100μl/孔，37℃孵箱，避光孵育，當標準曲線高濃度的顏色較深，有明顯的顏色梯度的時候，即可終止。試驗顯色反應請勿超過30分鐘。

    12.加入終止液（包括空白孔）100μl/孔，混勻后即刻測量OD（450nm）值（10分鐘內）。

    13.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按生物廢棄物處理。終止液為2M硫酸，使用時必須注意安全。

    14.各步驟加樣均應使用加樣器，并經常校準其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

    15.每次試驗測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔zui高濃度的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數（×n×5）。

    16.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

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